為指導養豬場做好非洲豬瘟監測工作,及時發現非洲豬瘟病毒特別是變異株感染情況,提升非洲豬瘟防控能力,特制定本技術指南。
一非洲豬瘟變異株的定義
非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等,與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比,該類毒株的基因組序列、致病力等發生明顯變化。生豬感染該類毒株后,潛伏期延長,臨床表現輕微,后期可出現關節腫脹、皮膚出血型壞死灶,感染母豬產仔性能下降、死淘率增高,出現流產死胎/木乃伊胎等。與傳統的流行毒株相比,生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間隙性排毒,難以早期發現。
二監測方法
(一)加強臨床巡視
時刻關注豬場各個環節豬只異常情況,想方設法提升飼養人員責任心,一旦發現豬只出現嗜睡、輕觸不起、采食量減少,發熱、皮膚發紅、關節腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸,育肥豬死淘率增高,母豬流產或出現死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現時,應第一時間采樣檢測。
(二)改進主動監測
每周對豬群進行病原和抗體檢測。在豬群進行疫苗接種、轉群、去勢,或母豬分娩后,應進行采樣檢測。豬場出現風險暴露或周邊豬場出現感染時,按需進行采樣檢測。
(三)抽樣策略
對可疑豬的同舍和關聯舍豬群,采集深部咽拭子和抗凝血,進行病原檢測,必要時采集血清進行抗體檢測。對可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿,以及舍內人員接觸的物品等,采集環境樣品進行病原檢測。病原檢測如果混檢,建議混樣數量不超過5個;抗體檢測不得混樣。
(四)樣品選擇
對可疑豬,按檢出概率高低排序,依次采集深部咽拭子、淋巴結(微創采集)、前腔靜脈抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。
對分娩母豬,應采集臍帶血、胎衣;對死胎和流產胎兒,應采集淋巴結、脾臟等組織樣品。
對病死豬,優選采集部位為淋巴結、脾臟、骨髓和肺臟。
血清樣本,按常規方法制備。
三監測方法
(一)病原檢測方法
采用非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重熒光PCR方法檢測核酸,詳見“農辦牧〔2020〕39號”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測規范》。必要時可測序鑒別。
(二)抗體檢測方法
采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測抗體水平,詳見《非洲豬瘟診斷技術》(GB/T 18648)。