偽狂犬?。≒seudombies.PR)是由偽狂犬病病毒(Pseudorabies Vims.PRV)引起的傳染病,可導(dǎo)致多種動物發(fā)病和死亡,其中豬是偽狂犬病病毒重要的儲存宿主和傳染源。該病毒主要引起妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或弱胎、返情或?qū)遗洳辉?,仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、衰竭死亡,中大豬嚴(yán)重掉膘,嚴(yán)重影響經(jīng)濟(jì)效益。偽狂犬病是豬場的主要傳染病,我國許多地區(qū)有豬偽狂犬病發(fā)生的報道剛。目前商品化的偽狂犬病疫苗對控制臨床發(fā)病有良好的作用,但常規(guī)免疫后商品豬群中仍常出現(xiàn)偽狂犬病野毒感染。為防止偽狂犬病野毒感染仔豬,部分豬場采用偽狂犬病弱毒疫苗滴鼻免疫技術(shù)。筆者于2012年3—9月在杭州某規(guī)模豬場進(jìn)行仔豬偽狂犬病弱毒疫苗滴鼻免疫是否受母源抗體干擾和兩種免疫程序免疫效果觀察的試驗(yàn),為生產(chǎn)上有效防控偽狂犬病提供參考。
1材料和方法
1.1試驗(yàn)材料
1.1.1試驗(yàn)豬場 杭州市某規(guī)模豬場,采用科學(xué)的現(xiàn)代養(yǎng)殖理念規(guī)范生產(chǎn),生產(chǎn)情況正常。但經(jīng)有關(guān)單位血清學(xué)檢驗(yàn),該場為偽狂犬病野毒感染陽性場。
1.1.2試驗(yàn)疫苗 豬偽狂犬病gE基因缺失活疫苗,由勃林格殷格翰公司生產(chǎn),批號:195一A66B。
1.1.3檢測試劑盒 使用美國IDExx公司的豬偽狂犬病gE抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒。
1.2試驗(yàn)方法
1.2.1 免疫程序和血樣采集 非滴鼻組90頭豬50日齡肌注l頭份,滴鼻組90頭豬2日齡滴鼻l頭份、50日齡肌注1頭份。于試驗(yàn)豬8、22、49、70、90、110、130、150日齡無菌采集血清,測定gB和gE抗體,分析母源抗體是否對滴鼻免疫產(chǎn)生影響、對比兩組免疫效果。
1.2.2抗體檢測和結(jié)果判定 抗體檢測方法按試劑盒說明書進(jìn)行。用酶標(biāo)儀測定各孔OD630nm值(S為樣品孔OD630nm值,N為陰性孔OD630nm值),根據(jù)S/N值判定PRV gB和gE抗體的陽性或陰性。
2結(jié)果與分析
2.1 50日齡注射免疫前gB和gE抗體水平
從表l可見,50日齡注射免疫前非滴鼻組和滴鼻組的gB抗體水平基本一致。從消長規(guī)律看,49日齡gB抗體陽性率明顯降低,這與仔豬斷奶后母源抗體減少有關(guān)。注射免疫前兩組均未檢測到異E抗體。
表150日齡注射免疫前偽狂犬病gB和gE抗體檢測結(jié)果
2.2 50日齡注射免疫后gB和gE抗體水平
從表2可見,50日齡注射免疫后,非滴鼻組gE野毒抗體陽性率隨日齡增長而持續(xù)上升,130日齡和150日齡甚至分別達(dá)到43.1%和49.2%,明顯受到野毒感染;而滴鼻組gE野毒抗體陽性率一直維持在很低的水平,無明顯野毒感染的現(xiàn)象。
70日齡后,非滴鼻組gB抗體陽性率明顯高于滴鼻組,恰好驗(yàn)證了這段時間內(nèi)非滴鼻組受到野毒感染、產(chǎn)生部分gB抗體。
表2 50日齡注射免疫后偽狂犬病gB和gE抗體檢測結(jié)果
3討論和小結(jié)
3.1母源抗體對滴鼻免疫的影響
眾所周知,母源抗體的存在,在一定程度上會對仔豬的免疫效果產(chǎn)生影響,而且對弱毒活疫苗的干擾尤為嚴(yán)重。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,對2日齡仔豬進(jìn)行滴鼻免疫后,檢測到的gB抗體與非滴鼻組基本一致,沒有出現(xiàn)母源抗體對仔豬滴鼻免疫干擾的現(xiàn)象,這可能與滴鼻免疫后疫苗毒僅在局部黏膜或神經(jīng)系統(tǒng)增殖,并不進(jìn)入血液系統(tǒng)與母源抗體發(fā)生中和反應(yīng)有關(guān)。而試驗(yàn)豬50日齡肌肉注射偽狂犬病gE基因缺失疫苗后3周,70日齡gB抗體陽性率僅達(dá)到72.6%,說明肌注免疫可能受到了母源抗體的干擾。
3.2兩種免疫程序的比較
對比兩種免疫程序后認(rèn)為,PRV陽性場采用滴鼻+肌肉注射的免疫方式既能較好地避免母源抗體對仔豬主動免疫的干擾,又能顯著降低野毒感染的幾率,顯示出良好的免疫效果,其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。