國家三類新獸藥——
雞新城疫、傳染性支氣管炎（La Sota株+Jin13株）二聯滅活疫苗
吳永鵬 天津瑞普生物藥業有限公司
一、研發背景
1.立項目的及意義
雞傳染性支氣管炎(IB) 是由雞傳染性支氣管炎病毒(IBV) 引起的一種急性、高度接觸傳染性呼吸道疾病，以咳嗽、噴嚏、氣管啰音、腎臟腫大及產蛋下降和蛋品質下降為其特征。IBV血清型眾多，至少有30 種之多，且不同血清型間缺乏有效的交叉保護，從而給IB 預防帶來諸多困難。
IBV早期感染危害大，死亡率高，易造成假母雞。臨床表現為蛋雞產蛋期沒有產蛋高峰，通常高峰期產蛋率只能達到60%-75%，有的甚至更低，在40%左右；產蛋雞群產蛋波動和蛋的品質不良，蛋殼品質下降，畸形蛋增多，蛋清稀薄如水。剖檢輸卵管不發育，或者輸卵管、子宮內大量積液。
肉雞和育雛雞感染IBV ，發生呼吸道癥狀并伴有飲水量增加，拉稀的發病表現，剖檢可見支氣管堵塞，花斑腎居多。死淘率較高，因雞的品種不同死亡率在8-40%之間。
除了傳支病毒的威脅，新城疫也是養禽業的必須免疫的
2.研發歷程
雞傳染性支氣管炎病是影響當前養禽業的主要疫病之一，類4/91毒株(即用含有4/91毒株的疫苗對分離株具有良好的交叉保護作用)是當前的主要流行毒株。瑞普生物藥業有限公司診斷研究中心對當前傳染性支氣管炎的分離毒株和疫苗毒株進行了S1基因的分子進化樹分析，并對疫苗毒株和分離毒株進行了單因子血清雞胚中和實驗，具體結果見圖1。
圖1 基于S1基因的分子進化樹
進化樹結果表明30株分離株S1基因核苷酸同源性在76.9%-100%之間，分別屬于A2(LX4)型和臺灣型。其中27株屬于A2(LX4)型，占比90%。他們之間核苷酸同源性為93.5%-100%，同源性很高。并且這27株可以分為2個亞型，其中13株屬于A2(LX4)型ClusterⅠ亞型，14株屬于A2(LX4)型 ClusterⅡ亞型。另有3株占10%屬于臺灣型，分別是BJ100306、JS121019和SD110329，他們之間的S1基因核苷酸同源性為87.5%-97.9%。說明近年來我國主要IBV分離株屬于A2(LX4)型，并且彼此間親緣關系較近，且與我國現用傳支主要弱毒疫苗和國外參考株屬于不同的基因型。
二、新獸藥名稱及主要成分
商品名：信之安
通用名：雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯滅活疫苗（La Sota株+Jin13株）
主要成份：每毫升疫苗含雞新城疫病毒（La Sota株）≥2.0×108 EID50，傳染性支氣管炎病毒（Jin13株）≥2.0×106 EID50。
三、新獸藥特點
1. 精選最新流行毒株，可以提供對當前主要傳支流行毒株交叉保護
瑞普公司診斷研究中心和河南農業大學禽病研究所共同合作，研究了最近幾年流行的雞傳染性支氣管炎病毒的生物學特性和分子特性后，篩選出雞傳染性支氣管炎病毒流行分離株Jin13株，其免疫原性好、抗原譜廣，交叉保護實驗表明，可以有效地保護目前雞傳染性支氣管炎的流行，保護雞群免受傳支病毒的侵襲。采用瑞普生物獨特的病毒克隆純化與復配技術，科學復配克隆純化的NDV-La Sota株、IBV- Jin13株，疫苗的抗原譜廣，抗原性能優良均一，可有效預防新城疫、傳染性支氣管炎疾病。
試驗一 IBV單因子血清雞胚中和試驗結果
表1 IBV單因子血清雞胚中和試驗結果
病毒 血清 | H120 | 4/91 | M41 | Jin13 | SC101228 | JS121019 |
H120 | 8/10 | 6/10 | 10/10 | 2/10 | 3/10 | 3/10 |
4/91 | 5/10 | 9/10 | 4/10 | 9/10 | 10/10 | 9/10 |
Jin13 | 7/10 | 9/10 | 6/10 | 10/10 | 9/10 | 10/10 |
從表1中可以看出，血清中和試驗研究結果證實了雞傳染性支氣管炎病毒4/91毒株和Jin13株的血清對我國目前流行的傳支病毒具有良好的中和效果；經試驗證實Jin13 株可以提供優于4/91和H120毒株的中和保護效果。
試驗二 傳染性支氣管炎分離株滅活疫苗對SD1004株的保護作用研究
抗體的檢測結果表明Jin13株抗體滴度較高，具有良好的反應原性，抗體上升的水平高且轉陽率高。
免疫后攻毒保護率統計表
組別 | 只數 | 免疫疫苗 | 攻毒毒株 | 發病 只數 | 死亡 只數 | 發病率 | 死亡率 |
A | 15 | Jin13 | JS121019 | 0 | 0 | 0% | 0% |
B | 15 | M41 | JS121019 | 6 | 2 | 40% | 13% |
C | 15 | H120 | JS121019 | 3 | 0 | 20% | 0% |
D | 15 | PBS | JS121019 | 14 | 5 | 93% | 33% |
對照 | 10 | -- | PBS | 0 | 0 | 0% | 0% |
攻毒后14天，剖殺5只雞，氣管、肺臟、腎臟IBV病毒分離結果
免疫疫苗 | 攻毒毒株 | 攻毒后第14天各組織帶毒情況 | ||
氣管 | 肺臟 | 腎臟 | ||
SD1004 | JS121019 | 1/5 | 1/5 | 0/5 |
Jin13 | JS121019 | 0/5 | 0/5 | 0/5 |
M41 | JS121019 | 1/5 | 3/5 | 1/5 |
H120 | JS121019 | 1/5 | 2/5 | 3/5 |
攻毒對照 | JS121019 | 3/5 | 4/5 | 3/5 |
攻毒保護試驗表明jin13株能夠提供對當前流行的A2型的毒株JS121019株優秀的保護。 按照發病率統計M41滅活疫苗、H120活疫苗不能對流行毒株提供保護，通過攻毒保護試驗獲得一株免疫原性較好（LX4型）疫苗毒株Jin13株。Jin13株制備的滅活疫苗抗原性優良：抗體滴度高、抗體陽性率高、攻毒保護效果好、病毒分離率低等，對我國當前主要流行毒株有較好的保護作用，同時對M型有很好的保護。
2. 疫苗純凈，副反應小
采用連續流離心技術，，可快速有效地去除尿囊液中的異源蛋白及其他雜質等，純化抗原，降低免疫副反應。
3. 超濾濃縮，抗原量高
應用進口濃縮設備生產，確保滅活前抗原含量為國標的10倍，抗體產生快，抗體滴度高，且維持時間長，無需加量使用。
4. 新型佐劑，吸收容易
采用進口新型佐劑，粘稠度低，易抽取、易注射、易吸收、且能激發良好的非特異性免疫反應。
5. 國際標準，質量穩定
瑞普生物與國際同步，嚴格執行歐盟GMP生產標準，確保產品批內一致，批間穩定，給您更高效的產品，更安全的保障。
四、用法與用量
頸部皮下或肌肉注射。兩周齡內雛雞每只0.2 ml，2-4周齡雛雞每只0.3 ml，4周齡以上的青年雞和成年雞每只0.5ml。
五、注意事項
本品用于接種健康雞。體質瘦弱、患有其他疾病者，不應使用；使用前仔細檢查疫苗，如發現破乳、疫苗中混有異物等情況下，不能使用；使用前應先使疫苗恢復到常溫并充分搖勻；疫苗啟封后，限當日用完；本品不能凍結；注射針頭等用具，用前須經消毒，注射部位應涂擦5%碘酒消毒；用過的疫苗瓶、器具和未使用的疫苗等應進行無害化處理；屠宰前28日內禁止使用。
