黃芪是一味歷史悠久,臨床應用十分廣泛,為歷代中醫最為常用的中藥之一.特別是近年來,隨著人們對多糖的研究的深入,發現多糖具有多方面的生物活性與功能.黃芪的主要活性成分之一黃芪多糖也因其在增強機體免疫力.降血糖,抗衰老方面有較強的活性而備受關注。HPLC法是近年來被用于定量測定。因其良好的分離功能而被應用與中藥制劑的含量測定。本文就黃芪的分類及產地,鑒別;化學成分;黃芪多糖的提取工藝;測定方法;藥理作用,臨床應用等幾方面作綜綜述如下。 1.1黃芪的產地及分類
在黃芪的本草考證一文中稱,從歷代本草有關黃芪產地的記述中可看出自南北朝名醫別錄起,黃芪的地道產地隨朝代的變換而變遷,初始產于四川中部、北部,陜西的西南部及甘肅南部,唐代移到甘肅的東部和寧夏的南部,宋代黃芪產地移到山西中部,到清朝后期,黃芪地道產地擴展到內蒙,直到民國中期才擴展到東北三省。
黃芪的品種繁多,主要為豆科植物蒙古黃芪和膜莢黃芪,此外還有東俄洛黃芪、毛果金翼黃芪、單蕊黃芪、無毛東俄洛黃芪、梭果黃芪、多化黃芪等。
1.2黃芪藥材的鑒別;
我國黃芪資源分布廣泛,品種繁多。一般的鑒別藥材方法為:根呈圓柱形,有的有分枝,上端較粗,長30-90厘米,表面淡棕黃色,有不規則的縱皺紋或縱溝.質硬而韌,不易折斷。斷面纖維性強,并顯粉性;皮部黃白色,木部淡黃色而放射狀紋理及裂隙,習稱金井玉欄;老根中心偶呈枯朽狀,黑褐色或為空洞。氣微,味微甜,嚼之微有豆腥味。
2.1黃芪的化學成分
黃芪含有多糖、甙類、黃酮和微量元素等多種成分。
膜莢黃芪的主要成分:黃芪甙、蔗糖、膜莢黃芪總甙、熊竹素、膽堿、毛蕊異黃酮、芒柄花黃素、氨基酸、苦味素、粘液質。
內蒙古黃芪的主要成分糖:芒柄花黃素、毛蕊異黃酮、亞油酸、亞麻酸、甜菜堿、煙酸、淀粉酶等。
黃芪多糖的組成為鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。
3.1 黃芪多糖的提取工藝
水煮醇沉法:稱取黃芪飲片,加水、8、6倍量,’分別煮沸1小時、40分鐘。過濾,合并2次濾液,濃縮至1:1(1克生藥相當于1毫升),加3倍量的95%乙醇沉淀,放置12小時以上,離心,沉淀蒸干。加水溶解,離心。取上清液,再加3倍量95%乙醇沉淀,冷藏后離心,沉淀物蒸干。
超濾法:稱取黃芪飲片,加水倍量,煎煮時間同上法,合并兩次濾液,冷藏后離心,取上清液用中空纖維超濾后,截留分子量6000以上的藥液,濃縮至1:1加3倍量95%乙醇沉淀,以下同上法。
微波技術提取法:用微波技術將黃芪用石油醚、乙醚除去脂溶性雜質,用80%的乙醇提取除去所含單糖、低聚糖等干擾成分后,再放入MCL-3型連續微波反應器中連續以水回流提取20分鐘,調整功率,減壓濃縮至一半體積,加入0.1%活性碳、脫色、過濾,濾液加入95%乙醇溶液醇含量80%,靜置過夜,過濾,殘渣用乙醚、無水乙醇反復洗滌即得。
4.1黃芪多糖的含量測定方法
苯酚-硫酸法
對照品的溶液的制備 取干燥至恒重的無水葡萄糖0.1g,精密稱定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得。
供試品的溶液的制備 精密量取本品50ml,置250ml量瓶中,加30%硫酸鋅溶液5ml,在水浴中加熱5分鐘后,在振搖下立即加入亞鐵氰化鉀試液5ml,冷卻后加水至刻度,搖勻,濾過,棄取初濾液,取續濾液25ml,置500ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得。
測定方法 精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml,分別置10ml量瓶中,各加2%苯酚溶液0.5ml,硫酸5ml,搖勻,置水浴中加熱15分鐘,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,照分光光度法測定。
5.黃芪多糖得藥理作用
5.1黃芪多糖的免疫調節活性
黃芪多糖可顯著增強非特異性免疫功能和體液免疫功能,顯著增強小鼠巨噬細胞的吞噬功能,促進血清溶血素形成,提高空斑形成細胞的溶血功能和明顯的碳離廓清作用和明顯增加脾重量。
5.2抗腫瘤作用
黃芪多糖對多種實驗型腫瘤油明顯的抑制作用。動物實驗表明,黃芪多糖與IL-2/LAK抗腫瘤作用相似,并對IL-2/LAK有抗腫瘤效應有明顯的增強作用。二者配伍應用可明顯提高LAK細胞對靶細胞的殺傷力。二者合并進行動態細胞免疫功能觀察,提示二者均具有抵抗鼠脾NK細胞活性和IL-2產生能力下降的作用。說明黃芪多糖的抗腫瘤作用與增強機體免疫功能的作用有關。
5.3對創傷感染的影響
黃芪多糖對實驗性小鼠創傷的藥理實驗表明,能明顯增強巨噬細胞吞噬發光強度并抑制PCE2的釋放,進一步促進TNF的釋放。免疫激活劑黃芪多糖與環氧化酶抑制劑布洛芬合用,既增強了巨噬細胞吞噬發光強度,又明顯抑制PGE2,TNF的IL-1的分泌。由此可見,免疫激活劑和環氧化酶抑制劑的組合可望成為創傷感染藥物治療的新方案。
5.4保護作用
張艷等人發現黃芪多糖對實驗性肝損傷又明顯的保護作用,可明顯對抗四氯化碳和撲熱息痛引起的小鼠血清谷丙轉氨酶,對二者引起的小鼠病理組織改變又明顯的保護作用。
5.5對血糖的調節作用
APs具有雙向調節作用。它能是葡萄糖負荷的小鼠血糖明顯降低,也能明顯對抗腎上腺素引起的小鼠血糖升高反應,而且它還能明顯對抗苯乙雙胍引起的小鼠實驗性低血糖。但是它對胰島素性低血糖無明顯影響。
6 黃芪多糖的臨床應用
6.1 治療糖尿病 黃芪多糖具有益氣固本、通脈降糖之功效。本品對諸病引起的神疲乏力、心悸、胸悶、腿腫的臨床癥狀又明顯的改善作 用。
治療肝炎 張鳳翎等用黃芪多糖治療肝炎結果表明。口服黃芪多糖患者,E抗原乙肝病毒-DNA轉陰率優于對照組。
對雞喉氣管炎的治療作用 郎景華等人用黃芪多糖注射液治療5萬余只3個月以上的患雞喉氣管炎,連用2-3天,治愈率在94.4%以上。
在黃芪的本草考證一文中稱,從歷代本草有關黃芪產地的記述中可看出自南北朝名醫別錄起,黃芪的地道產地隨朝代的變換而變遷,初始產于四川中部、北部,陜西的西南部及甘肅南部,唐代移到甘肅的東部和寧夏的南部,宋代黃芪產地移到山西中部,到清朝后期,黃芪地道產地擴展到內蒙,直到民國中期才擴展到東北三省。
黃芪的品種繁多,主要為豆科植物蒙古黃芪和膜莢黃芪,此外還有東俄洛黃芪、毛果金翼黃芪、單蕊黃芪、無毛東俄洛黃芪、梭果黃芪、多化黃芪等。
1.2黃芪藥材的鑒別;
我國黃芪資源分布廣泛,品種繁多。一般的鑒別藥材方法為:根呈圓柱形,有的有分枝,上端較粗,長30-90厘米,表面淡棕黃色,有不規則的縱皺紋或縱溝.質硬而韌,不易折斷。斷面纖維性強,并顯粉性;皮部黃白色,木部淡黃色而放射狀紋理及裂隙,習稱金井玉欄;老根中心偶呈枯朽狀,黑褐色或為空洞。氣微,味微甜,嚼之微有豆腥味。
2.1黃芪的化學成分
黃芪含有多糖、甙類、黃酮和微量元素等多種成分。
膜莢黃芪的主要成分:黃芪甙、蔗糖、膜莢黃芪總甙、熊竹素、膽堿、毛蕊異黃酮、芒柄花黃素、氨基酸、苦味素、粘液質。
內蒙古黃芪的主要成分糖:芒柄花黃素、毛蕊異黃酮、亞油酸、亞麻酸、甜菜堿、煙酸、淀粉酶等。
黃芪多糖的組成為鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。
3.1 黃芪多糖的提取工藝
水煮醇沉法:稱取黃芪飲片,加水、8、6倍量,’分別煮沸1小時、40分鐘。過濾,合并2次濾液,濃縮至1:1(1克生藥相當于1毫升),加3倍量的95%乙醇沉淀,放置12小時以上,離心,沉淀蒸干。加水溶解,離心。取上清液,再加3倍量95%乙醇沉淀,冷藏后離心,沉淀物蒸干。
超濾法:稱取黃芪飲片,加水倍量,煎煮時間同上法,合并兩次濾液,冷藏后離心,取上清液用中空纖維超濾后,截留分子量6000以上的藥液,濃縮至1:1加3倍量95%乙醇沉淀,以下同上法。
微波技術提取法:用微波技術將黃芪用石油醚、乙醚除去脂溶性雜質,用80%的乙醇提取除去所含單糖、低聚糖等干擾成分后,再放入MCL-3型連續微波反應器中連續以水回流提取20分鐘,調整功率,減壓濃縮至一半體積,加入0.1%活性碳、脫色、過濾,濾液加入95%乙醇溶液醇含量80%,靜置過夜,過濾,殘渣用乙醚、無水乙醇反復洗滌即得。
4.1黃芪多糖的含量測定方法
苯酚-硫酸法
對照品的溶液的制備 取干燥至恒重的無水葡萄糖0.1g,精密稱定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得。
供試品的溶液的制備 精密量取本品50ml,置250ml量瓶中,加30%硫酸鋅溶液5ml,在水浴中加熱5分鐘后,在振搖下立即加入亞鐵氰化鉀試液5ml,冷卻后加水至刻度,搖勻,濾過,棄取初濾液,取續濾液25ml,置500ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得。
測定方法 精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml,分別置10ml量瓶中,各加2%苯酚溶液0.5ml,硫酸5ml,搖勻,置水浴中加熱15分鐘,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,照分光光度法測定。
5.黃芪多糖得藥理作用
5.1黃芪多糖的免疫調節活性
黃芪多糖可顯著增強非特異性免疫功能和體液免疫功能,顯著增強小鼠巨噬細胞的吞噬功能,促進血清溶血素形成,提高空斑形成細胞的溶血功能和明顯的碳離廓清作用和明顯增加脾重量。
5.2抗腫瘤作用
黃芪多糖對多種實驗型腫瘤油明顯的抑制作用。動物實驗表明,黃芪多糖與IL-2/LAK抗腫瘤作用相似,并對IL-2/LAK有抗腫瘤效應有明顯的增強作用。二者配伍應用可明顯提高LAK細胞對靶細胞的殺傷力。二者合并進行動態細胞免疫功能觀察,提示二者均具有抵抗鼠脾NK細胞活性和IL-2產生能力下降的作用。說明黃芪多糖的抗腫瘤作用與增強機體免疫功能的作用有關。
5.3對創傷感染的影響
黃芪多糖對實驗性小鼠創傷的藥理實驗表明,能明顯增強巨噬細胞吞噬發光強度并抑制PCE2的釋放,進一步促進TNF的釋放。免疫激活劑黃芪多糖與環氧化酶抑制劑布洛芬合用,既增強了巨噬細胞吞噬發光強度,又明顯抑制PGE2,TNF的IL-1的分泌。由此可見,免疫激活劑和環氧化酶抑制劑的組合可望成為創傷感染藥物治療的新方案。
5.4保護作用
張艷等人發現黃芪多糖對實驗性肝損傷又明顯的保護作用,可明顯對抗四氯化碳和撲熱息痛引起的小鼠血清谷丙轉氨酶,對二者引起的小鼠病理組織改變又明顯的保護作用。
5.5對血糖的調節作用
APs具有雙向調節作用。它能是葡萄糖負荷的小鼠血糖明顯降低,也能明顯對抗腎上腺素引起的小鼠血糖升高反應,而且它還能明顯對抗苯乙雙胍引起的小鼠實驗性低血糖。但是它對胰島素性低血糖無明顯影響。
6 黃芪多糖的臨床應用
6.1 治療糖尿病 黃芪多糖具有益氣固本、通脈降糖之功效。本品對諸病引起的神疲乏力、心悸、胸悶、腿腫的臨床癥狀又明顯的改善作 用。
治療肝炎 張鳳翎等用黃芪多糖治療肝炎結果表明。口服黃芪多糖患者,E抗原乙肝病毒-DNA轉陰率優于對照組。
對雞喉氣管炎的治療作用 郎景華等人用黃芪多糖注射液治療5萬余只3個月以上的患雞喉氣管炎,連用2-3天,治愈率在94.4%以上。